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台盼蓝染色实验检测
服务介绍:台盼蓝是一种偶氮染料。活细胞有完整的膜结构,能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内;而丧失活性或细胞膜不完整的细胞,膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色。
染色原理:
台盼蓝(Trypan Blue)是一种人工合成的酸性染料,也是一种阴离子亲水性偶氮染料,常用于检测细胞的活力。其染色原理基于活细胞和死细胞膜通透性的差异:活细胞的细胞膜是完整的,具有选择透过性,能够阻挡台盼蓝这种大分子染料进入细胞内;而死亡或受损细胞的细胞膜则变得通透,允许染料渗透进细胞内部。一旦进入细胞内部,台盼蓝会与细胞内的各种成分结合,特别是与带正电荷的物质相互作用,从而使得整个细胞呈现蓝色。因此,台盼蓝只能给那些已经死亡或者膜破损的细胞着色,而活细胞则保持透明或淡黄色(取决于培养基的颜色)。
台盼蓝染色应用:
台盼蓝染色因其简单、快速且成本低廉,被广泛应用于细胞计数和细胞活性评估实验中,比如判断细胞存活率、优化细胞冻存与复苏步骤等。在细胞培养、转染、药物筛选等实验中,常需评估细胞存活率,台盼蓝染色提供了一种简便有效的方法。
注意事项:
1、时间控制:染色后应尽快计数,避免染料长时间作用导致活细胞误染。
2、染料浓度:台盼蓝溶液的浓度对染色效果有重要影响,浓度过高可能影响细胞膜的稳定性,导致活细胞误染。因此,应严格按照实验要求选择合适的浓度。
3、实验局限性:台盼蓝染色仅能区分细胞膜的完整性,无法评估细胞是否处于早期凋亡状态(早期凋亡细胞膜完整)。若需进一步分析细胞凋亡情况,可结合流式细胞术或其他凋亡检测方法。
仅供科研实验用,不做其他用途!
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