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染色制片(滴片/涂片)

[商品编号]:DC0061 [市场价]:¥询价

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产品描述

染色制片(滴片/涂片)

服务介绍:染色制片(滴片/涂片)实验是生物学和医学领域中常见的实验技术,用于观察和分析细胞或染色体的形态和结构。染色制片实验的主要目的是通过染色使细胞或染色体变得可见,从而能够观察和分析其形态和结构特征。这对于研究细胞分裂、遗传物质的结构与功能、疾病诊断等方面具有重要意义。 

染色原理:

1染色原理:使用特定的染料与细胞或染色体中的某些成分(如DNA、RNA、蛋白质等)结合,形成有色化合物,从而在显微镜下可见。

2制片原理:通过滴片或涂片的方式,将细胞或染色体均匀地分布在载玻片上,形成单层细胞或染色体,便于观察和分析。 

实验流程:

涂片制备:

  1.取细胞悬液,2800r 4℃离心5min,弃上清液,根据底部沉淀的细胞量加入2mL甲醇固定。若肉眼看不见细胞沉淀时,用3000r/min,4℃离心10min。

  2.取用甲醇重悬的细胞悬液,2800r 25℃离心5min,弃上清液,根据底部沉淀加入PBS:

  ①若肉眼看不见细胞沉淀时,用3000r/min,25℃离心10min,依然无沉淀时,留取底部约0.2ml的液体,再加入0.5ml的PBS混匀后用移液枪吸取200μL,滴于提前用组化笔画好的小圆圈中(3cm×2cm的椭圆);

  ②若细胞沉淀量很少,绿豆大小时,弃上清,留取底部沉淀,加入0.5mL PBS,用移液枪吹打混匀后,吸取200μL,涂于提前用组化笔画好的小圆圈中(3cm×2cm的椭圆);

  ③若细胞沉淀量很多,黄豆大小或更大时,弃上清,留取底部沉淀,加入2mL PBS,用移液枪吹打混匀后,吸取150μL,涂于提前用组化笔画好的大圆圈中(最大长边约5cm,最大短边约2cm的椭圆),在显微镜下观察细胞量的多少,若还是过厚,再用PBS对倍稀释该细胞悬液,直至在显微镜下观察到细胞量涂布均匀。

3. 用枪将细胞悬液铺满整个圆圈,涂片放置自然晾干。 

注意事项

1样本制备:滴片或涂片时,样本量要适中,避免过多或过少。涂片时要均匀,避免样本堆积或过薄。

2固定:固定时间要适当,过长或过短都会影响染色效果。固定剂要新鲜,避免失效。

3染色:染色时间要适当,过长或过短都会影响染色效果。染色后要彻底冲洗,避免染料残留。

4封片:封片剂用量要适中,过多或过少都会影响观察。盖玻片时要小心,避免产生气泡。

5观察:观察时要调整显微镜的亮度和对比度,以获得清晰的图像。长期观察时,避免封片剂干裂或变质。 

仅供科研实验用,不做其他用途!

 

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