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胆碱酯酶(CHE)测定试剂盒的定义
发布时间:2023/12/11 8:54:43 已浏览次数: 107 次

 胆碱酯酶(CHE)测定试剂盒的定义

(比色法)

一、测定原理:

血液及组织中 CHE 使乙酰胆碱水解成胆碱和乙酸,未

被分解的剩余乙酰胆碱与羟胺作用生成乙酰羟胺,再与铁离

子在酸性溶液中形成棕色复合物,根据颜色深浅推算出酶的

活力。

二、试剂组成与配制:(50 /48 样)

试剂一:溶液 60mL×1 瓶,室温保存 6 个月。

试剂二:乙酰胆碱粉剂×1支,

-20℃保存6个月,稀释液5mL×1

瓶,4ºC 保存 6 个月;80mmol/mL 乙酰胆碱底物贮

备液的配制:将 1 支乙酰胆碱粉剂倒入 5mL 稀释液

中溶解,4ºC 保存;8mmol/mL 乙酰胆碱应用液

配制:按 80mmol/mL 乙酰胆碱底物贮备液︰试剂一

= 19 的比例进行稀释,现用现配,用多少配多少。

试剂三:甲粉×1 支;乙液 30 mL×1 瓶;丙液 30 mL×1 瓶;

室温保存 6 个月。测试前将甲粉倒入乙液中,充分

摇匀,根据需要量将甲乙混合液与丙液等量混合,

充分混匀,配成试剂三应用液,现用现配。

试剂四:溶液 30 mL×1 瓶,室温保存 6 个月。

试剂五:溶液 20 mL×1 瓶,室温保存 6 个月。

试剂六:粉剂×1 ,稀释液 30mL×1 , 4℃避光保存 6 个月。

测试前将稀释液倒入粉剂中,充分混匀溶解后备

用。

三、操作步骤:

()、血清(浆)、组织的测定:

1、样本前处理:

血清(浆):直接进行检测。

组织样本:准确称取组织重量,按重量(g):体积(mL)=1:9

的比例,加入 9 倍的生理盐水,冰水浴条件下匀浆,制成

10%的匀浆液,2500 /分,离心 10 分钟,取上清液待

测。同时用 BCA 法或考马斯亮蓝法试剂测定组织蛋白。

2、操作表:

 

 

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