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单胺氧化酶(MAO)测定试剂盒的操作过程
发布时间:2023/12/8 9:17:07 已浏览次数: 36 次

 单胺氧化酶(MAO)测定试剂盒的操作过程

(紫外比色法 50 /48 样)

一、测定意义:

单胺氧化酶(Monoamine oxidaseMAO)在体内分布

很广,以肝、肾、脑组织中含量最多。组织中 MAO 主要

存在于线粒体上,和膜紧密结合;少量存在于细胞质可

溶成份中,血清中 MAO 是水溶性,与线粒体上的 MAO

不同,而和结缔组织中的 MAO 相似。MAO 能促进结缔

组织的成熟,在胶原形成过程中,MAO 参与胶原成熟最

后阶段的架桥形成,使胶原和弹性硬蛋白结合。

二、测定原理:

以苄胺为底物,在 MAO 作用下,生成苄醛,以环已

烷提取,在 242nm 测定吸光度,可测算出酶的活力。

三、试剂的组成与配制:

试剂一:液体 20mL×1 瓶,28℃避光保存 3 个月。

试剂二:液体 100mL×2 瓶,28℃保存 6 个月。

试剂三:液体 20mL×1 瓶,28℃保存(对皮肤有刺激)

3 个月。

试剂四:液体 100mL×2 瓶,28℃避光保存 3 个月。

四、操作过程:

1、样本前处理:

①、血清(浆):可直接进行测定。

②、组织:准确称取组织重量,按重量(g):体积(mL)=1:9

比例,加入 9 倍体积的生理盐水,冰水浴条件下

机械匀浆,制成 10%的匀浆, 2500 /分,离心

10 分钟,取上清待测。(取部分上清液测总蛋

白浓度,总蛋白定量试剂盒本所有售)

2、操作表:

 

* 比色皿在用双蒸水冲洗干净后,还必须用无水乙醇冲

洗,晾干后,备用。

[]:连续抽提是指在旋涡混匀器上持续混匀,不间断;

操作过程最好使用玻璃试管操作,有些耐有机试剂

腐蚀的离心管也可以;由于上清液为有机试剂易挥

,离心过后,需尽快完成比色。

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