如何制作鸡红细胞悬液
发布时间:2023/11/3 17:29:18 已浏览次数: 127 次

如何制作鸡红细胞悬液

01、心脏采血

鸡右侧卧自然保定，从膝关节稍前下方处垂直地面进针采血。

要点：

（1）采血前鸡尽可能处于自然状态。

（2）垂直地面进针：刺入正确时，松开注射器，会看到注射器随心脏的自然跳动。

（3）先把针全部刺入，如采不出，可以一边向上提注射器，一边采血，注意向上提注射器时速度要慢。

02、翅静脉采血

（1）捏住近心端，让翅静脉臌起。

（2）针头斜面向上，小角度刺入翅静脉中，待出现回血时，松开近心端，固定好针头进行采血即可。

鸡红细胞如何制备？

以1%鸡红细胞为例

把采集过动物血液的采血管依次放入卡套内，并将放置于离心机对角线的两个卡套配平，使其重量相同(相差不超过0.2g)，低温离心机4000r/min，离心10分钟。离心机的使用参照离心机的操作规程。

1、清洗红细胞

1.1 于超净台内采集上清液置于无菌血清瓶中即为血浆（不同的抗凝剂需做好标记），-20℃冷冻保存于固定区域

1.2 小心吸取红细胞上方的白细胞层，并弃去。

1.3 在每根吸除过白细胞的采血管中，加入和压积红细胞等体积的无菌1×PBS，并轻轻吹打混匀。

1.4 将混匀好的红细胞悬液转至15ml无菌离心管中，低温离心机2000r/min离心10分钟。

1.5 吸取上清液并弃去。

1.6 加入和压积红细胞等体积的无菌1×PBS，并轻轻吹打混匀。低温离心机2000r/min离心10分钟。重复1.5-1.6步骤一次，吸取上清液并弃去即为红细胞原液。

2、制作红细胞悬液

根据所需的红细胞百分比浓度，在血清瓶中加适量2-8℃保存的阿氏液和红细胞原液，制成1%的鸡红细胞悬液。

【应用】 ：

鸡红细胞悬液可以用于科研、教学实验，如总补体溶血活性（CH50）检测、辐射红细胞溶解实验、溶血空斑实验等，以及用于红细胞间接凝集试验、补体结合试验、T淋巴细胞E花环试验、制作致敏细胞、免疫注射抗体、制作血平板等试验。

【注意事项】 ：

1、注意不可冻融，每天需轻轻颠倒，将红细胞轻轻摇起。

2、长途运输过程中剧烈震荡可能导致本产品出现溶血现象，可以通过离心后PBS洗涤来除去破碎的红细胞。

3、注意无菌操作，低温保存，开封后请尽快使用完。

4、避免超长时间超远距离运输。

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