Cell Counting Kit-8 (CCK-8试剂盒)促销啦，快来选购
发布时间:2023/8/8 13:55:43 已浏览次数: 140 次

 Cell Counting Kit-8 (CCK-8试剂盒)促销啦，快来选购

Cell Counting Kit-8简称CCK-8试剂盒，是一种基于WST-8（化学名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐）的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。

WST-8属于MTT的升级产品，工作原理为：在电子耦合试剂存在的情况下，可以被线粒体内的脱氢酶还原生成高度水溶性的橙黄色的甲臜产物（formazan）。颜色的深浅与细胞的增殖成正比，与细胞毒性成反比。使用酶标仪在450nm波长处测定OD值，间接反映活细胞数量。

产品名称：Cell Counting Kit-8 (CCK-8试剂盒)

产品规格：500次

储存条件:  4℃避光

使用操作说明

一. 制作标准曲线（测定细胞具体数量）

1、先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量，然后接种细胞到培养板内。

2、按比例（例如：1/2比例）依次用培养基等比稀释成一个细胞浓度梯度，一般要做3-5个细胞浓度梯度，每个浓度建议

3-6个复孔。

3、接种后培养2-4小时使细胞贴壁，然后加CCK-8试剂培养一定时间后测定OD值，制作出一条以细胞数量为横坐标（X轴），OD值为纵坐标（Y轴）的标准曲线。根据此标准曲线可以测定出未知样品的细胞数量（使用此标准曲线的前提是实验的条件要一致，便于确定细胞的接种数量以及加入CCK-8后的培养时间。）

二. 细胞活性检测

1、在96孔板中接种细胞悬液（100 μL/孔）。将培养板放在培养箱中预培养一段时间（37℃,5% CO2）。

2、向每孔加入10 μL CCK-8溶液（注意不要在孔中生成气泡，它们会影响OD值的读数）。

3、将培养板在培养箱内孵育1-4小时。

4、用酶标仪测定在450 nm处的吸光度。

5、若暂时不测定OD值，可以向每孔中加入10 μL 0.1M的HCL溶液或者1% w/v SDS溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下。24小时内测定，吸光度不会发生变化。

三. 细胞增殖-毒性检测

1、在96孔板中配制100 μL的细胞悬液。将培养板放在培养箱预培养24小时（37℃，5% CO2）。

2、向培养板加入10 μL不同浓度的待测物质。

3、将培养板在培养箱孵育一段适当的时间（例如：6、12、24或48小时）。

4、向每孔加入10 μL CCK-8溶液（注意不要再孔中生成气泡，它们会影响OD值的读数）。

5、将培养板在培养箱内孵育1-4小时。

6、用酶标仪测定在450 nm处的吸光度。

7、若暂时不测定OD值，可以向每孔中加入10 μL 0.1M的HCL溶液或者1% w/v SDS溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下。24小时内测定，吸光度不会发生变化。

细胞活力计算：
细胞活力*（％）=[A（药物+）— A（空白）] / [A（药物—）— A（空白）] ×1
A（药物+）：具有细胞、CCK-8溶液和药物溶液的孔的吸光度；
A（药物—）：具有细胞、CCK-8溶液而没有药物溶液的孔的吸光度；
A（空白）：具有培养基和CCK-8溶液而没有细胞的孔的吸光度。

*细胞活力：细胞增殖活力或细胞毒性活力