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总胆固醇(T-CHO)测试盒性能指标
发布时间:2025/9/1 9:42:53 已浏览次数: 47 次

 总胆固醇(T-CHO)测试盒性能指标

检测原理:

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性能指标:

1、试剂空白管吸光度≤0.100(光径 0.5cm)。

2、线性:019.39mmol/L 范围内,r20.995

3、精密度:CV≤3%,批间相对极差≤5%

4、稳定性:原装试剂盒在 2℃~8℃避光保存,有效期为 12个月。开启后 2℃~8℃避光保存,可稳定 个月。

所需仪器耗材及试剂: 含 500nm 波长的酶标仪及 96 孔板,37℃水浴锅或恒温 箱,台式低速离心机,各种规格移液器,蒸馏水,涡旋混匀 器,试管或离心管。

操作过程

1、样本处理

①、血清():直接测定,如超过线性范围用生理盐水稀 释后测定。

②、培养液样本:吸取培养液,1000 /分,离心 10 分 钟,取上清测定。[]:一般建议细胞密度在 100 万个/mL 以上。 

③、组织样本:准确称取组织重量,按重量(g):体积 (mL)=1:9 的比例,加入 倍体积的匀浆介质,冰水 浴条件下机械匀浆,2500 /分,离心 10 分钟,取 上清液待测。[]:如组织样本均为非高脂样本,匀 浆介质统一用磷酸盐缓冲液(0.1mol/L pH 7.4)或生 理盐水进行匀浆提取;如组织样本均为高脂样本或 部分为高脂样本,匀浆介质可统一用无水乙醇进行 匀浆提取。

④、细胞样本: 

A、细胞收集:将制备好的细胞悬液取出,1000 /分, 离心 10 分钟,弃上清液,留细胞沉淀;用等渗缓冲 液(推荐 0.1mol/LpH77.4 磷酸盐缓冲液)清洗 1次,同样 1000 /分,离心 10 分钟,弃上清液, 留细胞沉淀; 

B、细胞破碎:加入 0.20.3mL 的匀浆介质(推荐 0.1mol/LpH77.4 磷酸盐缓冲液或生理盐水)进 行匀浆,冰水浴条件下超声破碎(功率 300W3/次,间隔 30 ,重复 3)或手动匀浆,制备好 的匀浆液不离心直接测定。也可采用裂解液裂解(推 荐 TritonX-100,12%,裂解 3040 分钟),裂解好的 液体不离心直接测定。

[]:建议收集的细胞密度在 100 万个/mL 以上。破碎 好的液体可显微镜观察细胞是否破碎完全。

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