溶液的配制：
1.提取液：自备6mol/L盐酸溶液，大约需要100mL，常温保存；试剂盒内提供一个30mL棕色空瓶，仅做分装使用，请自行标注试剂名称。
2.6mol/L盐酸提取液的配制：浓盐酸（37%）和H2O的体积比是1：1进行配制。
3.标准液：0.5mg/mL羟脯氨酸标准品。
产品说明：
HYP是机体胶原蛋白主要成分之一，胶原蛋白大多分布于皮肤、腱、软骨和血管等，因此HYP含量是反映胶原组织代谢及纤维化程度的一项重要指标。
样本经酸水解产生游离的HYP，进一步被氯胺T氧化，氧化产物与对二甲氨基苯甲醛反应，产生红色化合物，在560nm处有特征吸收峰。通过测定样本水解液560nm吸光值，可计算HYP含量。
自备仪器和用品：
天平、玻璃管、离心机、水浴锅、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、6mol/L盐酸、氢氧化钠溶液和蒸馏水。
操作步骤：
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
1.组织：称取约0.2g样本于EP管，将组织尽量剪碎以便消化，盖子稍松不密闭。加入2mL的提取液，煮沸或110℃烘箱2至6小时消化至没有可见大的团块（缠封口膜，防止爆盖），冷却后用NaOH溶液(10mol/L的大约需要1mL)调节pH值至6-8范围内(不可过酸或过碱)，再用蒸馏水定容至4mL。最后16000rpm，25℃，离心20min(若离心后仍有杂质，可通过过滤去除)，取上清待测。
2.细菌/细胞：取5×106个细菌/细胞，加入1mL的提取液，煮沸或110℃烘箱2至6小时消化至透明状(缠封口膜，防止爆盖)，冷却后用NaOH溶液(10mol/L的大约需要0.5mL)调节pH值至6-8范围内(不可过酸或过碱)，蒸馏水定容至2mL，16000rpm，25℃，离心20min，取上清待测。
3.液体样本：称取300μL液体样本于EP管，加入0.7mL的提取液(若测定数值过小可调整二者比例)，煮沸或110℃烘箱2至6小时消化至没有可见大的团块(缠封口膜，防止爆盖)，冷却后用NaOH溶液调节pH值至6-8范围内(不可过酸或过碱)，再蒸馏水定容至2mL。最后16000rpm，25℃，离心20min(若离心后仍有杂质，可通过过滤去除)，取上清待测。
注：提取过程中可能有黑色物质生成，若长时间不能消化，可能为碳化的物质，不影响实验。
注意事项：
1、如果测定吸光值超过线性范围吸光值，可以增加样本量或者稀释样本后再进行测定。
2、试剂有一定的毒性，请操作时做好防护措施，防止吸入或与皮肤接触。
3、按样本蛋白浓度计算时，需单独提取样本中的蛋白质并测定。
