DEPC处理水(0.1%)是一种在分子生物学实验中常用的试剂,主要用于RNA相关的实验。以下是对DEPC处理水(0.1%)的详细介绍:
一、定义与制备
DEPC处理水,即用焦碳酸二乙酯(DEPC)处理过的水。具体来说,它是使用0.1%的DEPC处理过的MiliQ纯水或去离子水,并经过高压蒸汽灭菌处理得到的。DEPC是RNA酶的化学修饰剂,与RNA酶的活性基团组氨酸的咪唑环反应,从而抑制酶活性。经过处理后的水中基本上不含DEPC,99.99%以上是水。
二、性质与特点
无菌:经过高压蒸汽灭菌处理,确保无菌状态。
无RNase:由于DEPC的作用,处理后的水中不含RNase,适用于RNA相关的实验。
特殊气味:由于含有微量的DEPC,处理水具有特殊气味。
pH值:约为7.4,接近中性,适用于大多数生物实验。
三、用途
DEPC处理水(0.1%)在分子生物学实验中有着广泛的应用,特别是在RNA相关的实验中。具体来说,它可用于:
RNA沉淀的溶解:作为溶剂,用于溶解RNA沉淀。
RNA反应体系:参与含有RNA的各种反应体系,如反转录、siRNA的退火等。
无RNase反应体系:适用于其他各种要求无RNase的反应体系。
四、储存与使用
储存条件:室温储存,有效期通常为1年。
使用注意事项:由于DEPC具有毒性,操作时应戴一次性手套和口罩,以防污染和吸入。
如果每次的使用量很小,可以适当分装后再使用,以减少开封次数,延长试剂的有效期。
试剂开封后请尽快使用,以防影响后续实验效果。
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