骨组织番红固绿染液是一种用于骨组织切片的特殊染色液,主要用于区分骨组织中的不同成分,如骨基质、软骨和胶原纤维。番红(Safranin O)和固绿(Fast Green)是两种常用的染料,能够分别染色软骨和骨基质,从而在显微镜下清晰显示骨组织的结构。
染色步骤
脱蜡和水化:
将石蜡包埋的骨组织切片依次放入二甲苯、乙醇梯度(100%、95%、80%、70%)和蒸馏水中进行脱蜡和水化。
番红染色:
将切片浸入番红染液中,染色5-10分钟。
用蒸馏水轻轻冲洗,去除多余染料。
分化:
使用70%乙醇进行分化,直至软骨组织呈现红色,而骨基质颜色变浅。
固绿染色:
将切片浸入固绿染液中,染色1-2分钟。
用蒸馏水轻轻冲洗,去除多余染料。
脱水:
将切片依次放入乙醇梯度(70%、80%、95%、100%)中进行脱水。
透明和封片:
将切片放入二甲苯中透明,然后使用中性树胶封片。
染色结果
软骨:红色(番红染色)
骨基质:绿色(固绿染色)
胶原纤维:绿色(固绿染色)
注意事项
染色时间:染色时间需根据切片厚度和组织类型适当调整。
分化控制:分化步骤是关键,需在显微镜下观察,避免过度分化。
染料保存:番红和固绿染液应避光保存,避免反复冻融。
废物处理:使用后的染液和有机溶剂应按照化学废弃物处理规范进行处置。
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