蛋白酶K/Proteinase K
蛋白酶K是一种枯草蛋白酶类的高活性蛋白酶,用于生物样品中蛋白质的一般降解。从林伯氏白色念球菌(tritirachium album limber)中纯化得到。蛋白酶K是一种切割活性较广的丝氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键。此酶经纯化去除了RNA酶和DNA酶活性。由于蛋白酶K在尿素和SDS中稳定,还具有降解天然蛋白质的能力。
产品:蛋白酶K
含量:≥20mg/ml 【24mg/ml】
纯度:≥95% SDS-PAGE
活性:≥30U/mg 【42U/mg】
DNase:未检出
RNase:未检出
CAS号:39450-01-6
类型:非特异性、枯草杆菌蛋白酶相关的丝氨酸蛋白酶
分子量:28,900道尔顿(28.9kDa)
物理和化学性质
溶液颜色:无色透明,如出现沉淀则不能再使用
稳定性:在尿素和SDS中稳定,EDTA等螯合剂或SDS等去垢剂均不能使之失活
活性范围:在较广的pH范围(4~12.5)内及高温(50~70°C)均有活性
作用与功能
DNA提取:蛋白酶K在DNA提取中的主要作用是酶解与核酸结合的组蛋白,使DNA游离在溶液中,随后用不同方法进行抽提,除去杂质,收集DNA。
RNA提取:在RNA提取过程中,蛋白酶K可以抑制RNA酶的活性,降低RNA酶对RNA的降解作用。
原位杂交技术:用于杂交前的处理,具有消化包围靶DNA蛋白质的作用,以增加探针与靶核酸结合的机会,提高杂交信号。但需注意浓度过高、消化时间过长或孵育温度过高时,会对细胞结构造成破坏。
病毒灭活:蛋白酶K因其蛋白水解能力可以破坏病毒表面的蛋白,具有作为病毒灭活消毒剂的潜力。
工业应用:在皮革、毛皮、丝绸、医药、食品、酿造等方面有广泛应用,如皮革工业的脱毛和软化、蚕丝脱胶、肉类嫩化等。
应用注意事项
在使用蛋白酶K时,应注意控制其浓度和处理时间,以避免对细胞结构造成不必要的破坏。
蛋白酶K具有自我酶解特性,在无保护剂时很难长期稳定保存,因此在制备和储存过程中需要特别注意。
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